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胰岛素自身抗体(IAA)ELISA 试剂盒检测原理

时间:2019-09-29 16:50:31

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胰岛素自身抗体(IAA)ELISA 试剂盒检测原理

目前发现,胰岛素抗体产生的原因有以下两种情况:

种情况:在从未用过胰岛素的受试者体内出现的,对自身分泌的胰岛素产生的抗体,即胰岛素自身抗体(insulin autoantibody,IAA)。这种抗体被认为是在胰岛β细胞损伤、胰岛素分泌异常时产生的自身免疫性抗体。虽然在正常人体内这种抗体也可能有少量存在,但一般情况下测不到或浓度较低,定性结果为阴性。高浓度的IAA常出现在1型糖尿病患者或潜在患者身上。1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,其特征是免疫介导的胰腺β细胞破坏。胰岛素自身抗体(IAA)在许多患有1型糖尿病高风险的受试者在临床疾病发作和暴露于外源性胰岛素之前会产生。

第二种情况:应用外源胰岛素后患者体内出现的抗胰岛素的抗体。这是一种针对外源性胰岛素的抗体,为非自身免疫性抗体,习惯上常称之为胰岛素抗体(insulin antibody,IA)。实际上这个习惯称谓不贴切,也不准确。外源性胰岛素抗体是在使用外源性胰岛素时,由于外源性胰岛素具有抗原性,刺激机体免疫系统产生的能与胰岛素结合的抗体,常导致患者胰岛素治疗剂量逐步增大才能达到理想的治疗效果。这种抗体一般在应用外源性胰岛素后1~2个月左右出现。外源性胰岛素纯度越低,产生抗体的滴度就越高。所以,应用动物源胰岛素的患者体内出现胰岛素抗体比较普遍,患者耐药情况也比较普遍和严重。

胰岛素抗体中包括了胰岛素自身抗体和外源性胰岛素抗体(非自身抗体)。胰岛素自身抗体与外源性胰岛素抗体都是胰岛素抗体的一种类型,他们都属同一种抗体——胰岛素抗体。因为,他们有同一个抗原——胰岛素。但是,胰岛素自身抗体与外源性胰岛素抗体产生的机制不同,临床意义也不一样。

艾美捷胰岛素自身抗体(IAA)ELISA 试剂盒特别支持研究中的胰岛素自身抗体(IAA)的分析(仅用于科研,不可用于临床诊断)。

小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒是用于体外定量测量小鼠血清、血浆及其他生物液体中的小鼠胰岛素自身抗体(IAA)浓度。

检测原理:

该试剂盒基于夹心法酶联免疫吸附测定技术。将抗原预包被到96孔板上。将标准品,测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。然后加入结合了HRP的试剂,并孵育整个板子。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后,只有含有足够IAA的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与结合在板上的IAA量成正比。在酶标仪中于450nm处以分光光度法测量光密度(OD),由此可计算出IAA的浓度。

小鼠胰岛素自身抗体(IAA)的OD值标曲

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