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斐林试剂与双缩脲试剂的区别

时间:2019-06-17 05:25:33

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斐林试剂与双缩脲试剂的区别

斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在,斐林试剂可与还原性糖反应生成砖红色沉淀。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。二者溶液浓度不同、使用原理不同、使用方法不同。

溶液浓度不同

CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/mL;

CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/mL。

使用原理不同

斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

使用方法不同

斐林试剂使用时,先等体积混合甲、乙两液,而后立即使用,反应需要加热(有时不加热也反应);双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液(1mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振荡摇匀后观察现象。

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