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08 beta-actin和GAPDH的3'/5'比值

时间:2023-10-04 11:35:43

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08 beta-actin和GAPDH的3'/5'比值

一、大部分的基因都有beta-action基因和GAPDH基因,很多Affymetrix芯片都将它们设为一组观察RNA降解程度的内参基因。mRNA是按照5’至3’的顺序来降解的,通过比较它们3’相对于中间或者3’相对于5’的信号强度,可以很好地指示出试验质量。

二、beta-action基因对应的探针组:

AFFX-HSAC07/X00351_3_at

AFFX-HSAC07/X00351_5_at

AFFX-HSAC07/X00351_M_at

GAPDH基因对应的探针组:

AFFX-HUMGAPDH/M33197_3_at

AFFX-HUMGAPDH/M33197_5_at

AFFX-HUMGAPDH/M33197_M_at

三、以样品GSM362947_LTT.CEL和GSM362948_LTT.CEL为例:

library(yaqcaffy)

rawData<-ReadAffy("GSM362947_LTT.CEL","GSM362948_LTT.CEL")

qcResult<-qc(rawData)

>qcProbes(qcResult)

AFFX-HSAC07/X00351_3_atAFFX-HSAC07/X00351_5_at

GSM362947_LTT.CEL11.7185110.79642

GSM362948_LTT.CEL11.7823410.14348

AFFX-HSAC07/X00351_M_atAFFX-HUMGAPDH/M33197_3_at

GSM362947_LTT.CEL11.1506811.58672

GSM362948_LTT.CEL10.9107011.74464

AFFX-HUMGAPDH/M33197_5_atAFFX-HUMGAPDH/M33197_M_at

GSM362947_LTT.CEL11.2736011.32698

GSM362948_LTT.CEL11.2630311.61652

>ratios(qcResult)

actin3/actin5actin3/actinMgapdh3/gapdh5gapdh3/gapdhM

GSM362947_LTT.CEL0.92209250.56782850.3131.2597466

GSM362948_LTT.CEL1.63886390.87164670.48161720.1281214

这些探针组的表达值是用JustMAS算法得到的。观察以上数值可以得出这样的结论:

actin3/actin5的值等于AFFX-HSAC07/X00351_3_at的表达值减去AFFX-HSAC07/X00351_5_at的表达值;actin3/actinM的值等于AFFX-HSAC07/X00351_3_at的表达值减去AFFX-HSAC07/X00351_M_at的表达值……

事实上,比值=log2(a)/log2(b)=log2(a-b),但是这些探针组表达值已经取了2的对数,所以两数相减就是结果了

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