促甲状腺激素(TSH)定量检测试剂盒(磁分离酶联免疫法)
【生产厂家】北京倍爱康生物技术有限公司
【批准文号】国药准字S0022
【剂 型】检测试剂盒
【规 格】200管份
【医保类型】
【国家基本药物】否
【药品名称】
促甲状腺激素(TSH)定量检测试剂盒（磁分离酶联免疫法）
【用途】
本品是为定量测定人血清或血浆内人促甲状腺激素(TSH)而设计的，用于原发性和继发性甲状腺疾病的辅助诊断及疗效评价。
本方法适用样品浓度为0~50μIU/ml，不必稀释。标准品采用人TSH 国际标准品(WHO 2nd IRP 80/558) [1]及中国国家标准品(530-0106)定值。
【概述和说明】
促甲状腺激素(TSH)是垂体分泌的一种糖蛋白，分子量约28000。它由α和β两个亚单位组成。另外一些激素也有与TSH基本相同的α亚单位，如由垂体分泌的促黄体生成激素(LH)和促卵泡激素(FSH)以及由胎盘产生的人绒毛膜促性腺激素(hCG)，它们的差别主要是在β亚单位的氨基酸序列上[2]。这些差别赋予了它们的完整分子各不相同的生物学特异性，从而可以用免疫分析方法把它们区别开来。
TSH的合成和释放受到促甲状腺激素释放激素(TRH)的激发。TRH是下丘脑产生的一种三肽，由垂体柄中的特殊小管直接引导至垂体前叶[3]。这种释放的激发从属于甲状腺激素T4和T3的负反馈效应[4]。
与其它糖蛋白激素一样，TSH有其特定的活动部位——甲状腺。TSH的主要功能是调节甲状腺素(T4)和生物活性更强的三碘甲状腺原氨酸(T3)的释放，控制它们合成的不同阶段[5]。这些甲状腺激素在血循环中大部分与甲状腺结合球蛋白(TBG)结合，少部分与白蛋白、前白蛋白结合。游离的T3和T4广泛作用于机体其它器官系统，全面调节新陈代谢活动水平[6]。它们还对垂体施加负反馈来抑制TSH的释放。
正常人的这些激素相互作用保持动态平衡。TRH刺激垂体产生和释放TSH，后者促使甲状腺释放T3和T4，而循环中的T3、T4水平又对垂体施加负反馈以抑制TSH的释放[7]。这样就维持了一种动态平衡。但是，当T4和/或T3产生过多(甲状腺机能亢进)或过少(甲状腺机能减退)，造成负反馈循环中任一阶段异常，平衡就被打乱了并表现出临床症状。
由甲状腺激素相对过剩引起的甲状腺机能亢进，可以是原发的也可以是继发的，这要看是甲状腺本身异常还是垂体异常[8]。有多种疾病(如Grave病、腺瘤、甲状腺肿、自律性小结等)能引起整个或部分甲状腺过度活动，不需要通过TSH的激发而直接释放T3和T4。这些激素能反馈作用于垂体，抑制TSH的产生。因此原发性甲状腺机能亢进的病人，T3、T4的水平高，同时TSH的水平低或为0。T3、T4水平升高也可以是因为TSH过量，过度刺激甲状腺产生的结果，这种情况形成了继发性甲状性机能亢进，这时所有激素的水平都升高。
由甲状腺激素相对缺乏引起的甲状腺机能减退，也可以分为原发性和继发性两种[8]。对于原发性甲状性机能减退患者，甲状腺无法产生T3和T4—例如由碘缺乏引起，其特征是T3和T4水平低而TSH的水平因消除了前者的反馈抑制而升高。若垂体释放TSH减少，使之不能充分激发甲状腺产生适量T3和T4，引起继发性甲状腺机能减退，在这种情况下所有激素的水平都低。TRH刺激试验有助于正确诊断甲状腺机能减退。原发性甲状腺功能减退患者通常表现为反应过度，而继发性甲状腺功能减退患者反应减弱甚至无反应。
【原理】
本方法[9]是酶联免疫分析系统与磁性微粒分离技术相结合的一种测定法，并使用了两种高亲合力的单克隆抗体。
标本、标准品和质控品(A)在试管内与抗TSH单克隆抗体反应。酶联单克隆抗体很快从TSH分子的一侧与TSH分子结合，另一荧光素标单克隆抗体在另一侧与TSH分子结合，形成“三明治”结构(B)。37℃孵育30分钟后加入过量的包被着抗荧光素抗体的磁性微粒。它快速、特异地结合在TSH单克隆抗体复合物上(C)，无需离心，在磁场中沉淀(D)。倒去上清液，清洗沉淀的复合物后加入基质(E)。37℃孵育60分钟后，加入终止液结束酶/基质反应(F)，然后用磁分离免疫测定仪测量所形成颜色的强度。
酶反应形成的颜色强度在测定工作范围内与患者标本中TSH的浓度成正比。这样，患者标本、质控品中的TSH浓度可用内插法直接从标准曲线求得。
【试剂】
本试剂盒提供了测定200管标本所需试剂。收到试剂盒后，2~8℃贮存至标签所示失效期。
1.试剂组成
⑴TSH 抗试剂1瓶
内容物为含羊、牛血清蛋白的Tris缓冲液配制的荧光素标和碱性磷酸酶标抗TSH单克隆抗体。20ml。
⑵TSH 标准品6瓶
分别为含0、0.15、0.5、1.5、5和50μIU/ml TSH(2nd IRP 80/558)的牛血清溶液(含0.2%w/v的NaN3)。“0”浓度标准品为3ml，其余浓度标准品为2ml。
⑶磁分离试剂1瓶
内容物包括共价包被着羊抗荧光素抗体的磁性微粒0.6%w/v、含牛血清蛋白的Tris缓冲液和0.2%w/v的NaN3。20ml。
⑷清洗浓缩液1瓶
含有表面活性剂、防腐剂的Tris缓冲液。14.3ml。
⑸基质2瓶
含有单磷酸酚酞(PMP)、辅酶的缓冲液。每瓶15ml。
⑹终止液 1瓶
含有氢氧化钠和螯合物的缓冲液，PH>10，100ml。注意：有腐蚀性(见“5.5”节)。
⑺通用质控品1瓶
冻干人血清，复溶后为1ml。
2.试剂的准备和贮存
⑴TSH抗试剂
随时可用，2~8℃贮存至失效期，避免阳光直射。
⑵TSH标准品
随时可用，2~8℃贮存至失效期。
⑶磁分离试剂
随时可用。用前轻轻、彻底混匀，确保磁性微粒悬浮均匀。不能使用磁力搅拌器搅拌。2~8℃贮存至失效期。不能冻存。
⑷清洗浓缩液
加纯化水至150ml，混匀。稀释后2~8℃贮存至失效期。
⑸基质
随时可用，2~8℃贮存至失效期，避免阳光直射。
⑹终止液
随时可用，2~8℃贮存至失效期。
⑺通用质控品
用1.0ml纯化水复溶，在室温放置30分钟。用前轻轻摇匀。复溶后2~8℃保存2天，或分装后于-20℃或以下可保存30天。
3.试剂变质迹象
⑴基质液应呈浅黄色，略带红色亦可使用(0.15ml基质液与0.5ml终止液混匀，以水调零，A550<0.1)。
⑵冻干质控品泛潮。
⑶分离试剂的磁性微粒凝集。
⑷TSH抗试剂、标准品或清洗浓缩液中有沉淀。
【注意事项】
本试剂仅用于体外诊断，不同批号试剂不能互换，超过有效期，请停止使用。
1.安全防范
1.移液时不要用嘴吸移液管。
2.操作区内不要吸烟、进食或化妆。
3.用一次性吸头移液，避免交叉污染。
2.叠氮钠(NaN3)
某些试剂中含NaN3，其最终浓度<0.2%w/v。NaN3可与铅、铜等金属直接生成极毒金属叠氮化物，处理时要用大量清水冲洗，防止叠氮化物生成。
3.人血清
试剂盒质控品是由人血清制备的，用免疫分析法检测血清中乙型肝炎表面抗原和人免疫缺陷病毒(HIV)抗体呈阴性。但是鉴于没有任何一个检测手段可确保无HIV、乙型肝炎病毒或其它传染因子存在，因而还是应该把该试剂看成是一种潜在的生物危险品，处理时要象对待任何一种血清或血浆标本一样谨慎。
在根据发布的中华人民共和国国家标准“实验室——生物安全通用要求”所规定的处理方法实施。
我们提请用户注意：操作时应确保切口、磨损和其他皮肤损伤处受到充分保护，以防止自我接种或溅在粘膜上。
4.标准品
标准品(除了零标准品)是由人垂体提取液制备的，但是鉴于没有任何一个检测手段可确保无HIV存在，因此建议用户在使用本试剂时，要象对待潜在的生物危险品一样慎重(见“5.3”节)。
5.氢氧化钠(NaOH)
终止液中含NaOH，避免与眼、皮肤、粘膜接触，若发生意外，先用大量清水冲洗，再求医。
【标本采集与保存】
1.血清
取5.0ml静脉血至玻璃试管中，不加添加剂，在室温中静置，通过离心分离血清部分，贮存。
2.血浆
取5.0ml静脉血至玻璃或塑料试管中，以肝素为抗凝剂，通过离心分离血浆部分，贮存。
血清和血浆标本2~8℃稳定24小时。若需较长时间保存，先分装，于-20℃可保存30天，避免反复冻融。
3.稀释
若估计标本浓度超出50μIU/ml，测定前需稀释。稀释液最好为经测定其TSH浓度在甲状腺机能正常值范围之内的人血清。
例如：
a)取0.1ml待测标本至一试管中。
b)加0.5ml已测正常血清并混匀。
c)取0.1ml稀释后的标本按照实验步骤进行测定。
d)参考8.1节进行计算。
4.已知干扰因素
严重溶血的标本，严重高脂血症标本，碱性磷酸酶活性高的标本(Paget病，胆汁阻塞等)，严重黄疸病标本，EDTA为抗凝剂的血浆标本(EDTA能抑制酶/基质反应)。
【试验步骤】
1.提供的物品
本试剂盒(产品号码：12731504)内试剂可供200支试管测定，所含组份如下：
试 剂
产品号码
瓶数
TSH 抗试剂
12731516
1
TSH 标准品
12731517
6
磁分离试剂
75001511
1
清洗浓缩液
75001501
1
基质
75001502
2
终止液
如果觉得《促甲状腺激素(TSH)定量检测试剂盒(磁分离酶联免疫法)》对你有帮助，请点赞、收藏，并留下你的观点哦！
