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影响化学发光免疫的测定因素分析!

时间:2022-01-19 20:26:39

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影响化学发光免疫的测定因素分析!

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是免疫反应系统和化学发光分析系统相结合的技术;是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项免疫测定技术。主要具有灵敏度高、特异性强、试剂价格低廉、试剂稳定且有效期(6-18个月)、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单自动化程度高等优点。

本文主要介绍影响化学发光免疫技术测定的因素。

1标本的影响

样本因素主要有:溶血、脂血

溶血对检验结果的影响:溶血是临床检验中最常见的一种干扰和影响因素,红细胞、血小板、白细胞等血细胞被破坏后释放的某种成分会干扰或影响检测指标的测定,以红细胞被破坏最为常见。红细胞破坏使胞内高浓度成分逸出到细胞外,使血浆或血清中成分的浓度升高,如钾、镁、LDH、AST、ALT、ACP、CK、CI、精氨酸、叶酸、维生素E、醛缩酶、丙酮酸激酶等;同时细胞内含量低的物质进入血清,使血清形成稀释,导致测结果降低。被破坏的粒细胞系统会释放岀谷氨酸脱氢酶等酶类,使被测血清酶含量升高。血小板被破坏后,可使钾、镁、酸性磷酸酶、醛缩酶等量升高。严重溶血标本原则上不能使用,应重新抽血送检,特殊原因不能重新采样者应在报告单上标注“溶血”字样,提醒医师注意。

脂血对检验结果的影响:饮食中蛋白和脂肪摄入过多,血液中可出现乳糜微粒,此时三酰甘油含量显着升高,ALT、胆红素、无机磷和糖都有不同程度的升高,其他一些生化指标也会受到影响。因此,要使检验结果准确,应嘱采血病人禁食10-12小时再采血。对特殊检查如血液流变学和血渗透压检验除空腹外还应嘱其禁食12小时以能采加。

2.样本类型的影响

大多数厂家建议样本类型为血清,一般不建议用血浆,是因为血清的符合率最高,而且血浆中有纤维蛋白原,易堵针。

3.试剂影响

化学发光免疫检测试剂厂家较多,不同的厂家采用不同的检测方法:如直接化学发光法,酶促发光法,电化学发光法。试剂的运用需要严格按照说明书来,试剂的保存,有效期,按照要求定标,磁微粒需要摇匀足够时间,不同批号试剂不宜混用等,这些都会对结果造成一定的影响。

4.仪器的影响

仪器的影响主要有仪器吸量的准确,这个一般可以测试试剂针样本针的CV;测量室的准确性:测量室主要测量发光量,如果漏光或者有发光物质干扰,就会直接影响测量结果;温浴室的影响:温浴室提供恒定的温度,一般模拟人体温度,如果温度不恒定,或者过高过低,对于免疫反应具有直接的影响;激发液的影响:对于直接化学发光法,激发液A/B必须稳定,激发液会直接影响测试结果;实验水的影响:一般厂家都用浓缩清洗液按照比例与实验水混合后作为清洗液,应严格按照厂家要求。

临床化学发光免疫分析技术具有灵敏度高、特异性强的优点,结果如果出现假阳性或假阴性与临床表现不符等,要从多方面进行分析,并采取相应措施排除干扰作用,从而为临床提供正确可靠的检测结果。

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