与现代仪器提取分离方法相对应,经典的提取分离方法是指从天然产物化学研究的早期即开始应用,沿用至今并且行之有效的方法。这些方法主要基于各种成分物理或化学性质如溶解度、极性、酸碱性等的不同而采用与之相适应的方法,如选择不同溶剂,由低极性到高极性分步提取;用不同溶剂或试剂分步沉淀或分步结晶等。
所谓提取,就是用适当的溶剂将拟研究的化学成分从动物或植物等组织中抽提出来的过程。常用的经典提取方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法和升华法等。提取可以在室温下进行,也可以加热提取,但总的来说,冷提杂质较少,而热提效率较高,但杂质较多。
1. 溶剂提取法
主要是根据化合物在极性相似的溶剂中有较好的溶解性即“相似相溶”这一原理进行的。有机物分子中,有的亲水性基团多,极性大而疏于油;有的亲水性基团少,极性小而疏于水。因此,采用极性不同的溶剂可以将植物中的不同成分溶出。
常用溶剂的极性度强弱顺序可表示如下:
石油醚(低沸点→高沸点)<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烯<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<乙腈<水<吡啶<乙酸。
2. 水蒸气蒸馏法
此法适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏的天然产物成分的提取。被提取的化合物与水不相混溶或仅微溶,并且在约100℃时有一定的蒸气压,当水蒸气加热沸腾时,能将该物质一并随水蒸气带出。植物中的挥发油、某些小分子生物碱、某些小分子的酸性或中性物质均可使用本法提出。对一些在水中溶解度较大的挥发性成分可采用蒸馏液重新蒸馏的办法,收集最先馏出部分,使挥发油分层,或用盐析法将蒸馏液中挥发性成分用低沸点非极性溶剂提取出来。
3. 升华法
某些固体物质如水杨酸、苯甲酸等受热时,在低于其熔点的温度下,可不熔化直接变成气态,遇冷后又凝结成原来的固体,此种现象称为升华。升华简单易行,但往往不完全,常伴有成分分解现象,产率低,不适合大规模制备。
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