变异PEDV导致我国PED的重新暴发-猪病小谢的江湖风云录8

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1猪流行性腹泻在我国的重新暴发流行Sun等报道了，从10月份开始，重新暴发的猪流行性腹泻（PED）造成我国南方超过十个省的超过一百万头仔猪的死亡，七日龄仔猪的发病率可达100%，死亡率为80%-100%（表1；Sunetal）。

2变异PEDV导致我国PED的重新爆发，笔者所在实验室的李文涛等通过对病原PEDV毒株的全S基因的测序发现变异PEDV毒株导致了我国PED的重新暴发（Lietal）。我们实验室也对变异PEDV毒株的全基因组特征进行了研究，表明变异PEDV毒株和经典PEDV毒株属于不同的遗传进化分支，变异区域主要位于S基因（图1；吴美洲等 ）。

3变异PEDV毒株的毒力强

Wang等将分离的变异PEDV毒株YS和ZB分别感染4日龄的仔猪（每组5只），感染后3-5天出现腹泻症状，感染这两种毒株后约5天，所有感染组的猪只死亡。死亡猪只胃粘膜出血、脱落，肠系膜淋巴结肿大充血，肠壁出血（图A）。组织病理学变化包括上皮细胞脱落、固有层出血和淋巴细胞过度浸润，以及肠粘膜充血、水肿和上皮细胞脱落（图B）（Wangetal）。

图2.仔猪感染实验。（A）肠壁出血。（B）肠粘膜充血、水肿和上皮细胞脱落。（Wangetal）

4PEDV毒株的分离

4.1经典PEDV毒株的分离：

从1966年开始，我国不断有仔猪腹泻病的报道。直到1984年宣华等才证实PEDV是引起我国仔猪腹泻病的主要病因，并运用猪肠胎单层细胞成功分离到PEDV华（H）株、川（CH）毒株及吉（J）毒株（宣华等 1984）。1988年瑞士学者运用向Vero细胞维持液中加入适量胰酶的方法成功分离到PEDV（Hofmann and Wyler 1988)。1992年和1993年日本学者（Kusanagiet al1992)和韩国学者（Kweonet al1993）分别报道了PEDV毒株的成功分离。我国学者吴凌和李一经于也报道了PEDV毒株LJB/03的成功分离。但PEDV的实验室分离依然困难。

4.2变异PEDV毒株的分离

我国Pan等（图3；Panet al）、吴美洲（吴美洲等）等及美国的Oka等（图4；Okaetal）使用类似1988年瑞士学者报道的方法分离得到了变异的PEDV毒株。分离的关键是使用Vero细胞（CCL-81™，ATCC），维持液含0.3%磷酸盐肉汤（TPB）、10 mg/mL的胰酶、100 units/mL的青霉素以及100 mg/mL的链霉素等。

图3.我国学者对变异PEDV毒株的分离鉴定（Panetal）

图4.美国学者对变异PEDV毒株的分离鉴定（Okaetal）

作 者:陈芳洲

审阅者:刘爱民博士(liuxx063@umn.edu)

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